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細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題分析

1.何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度和生長(zhǎng)狀態(tài)而定，有的細(xì)胞消耗培養(yǎng)液較快，細(xì)胞有60-70%的匯合度就可以消化傳代，簡(jiǎn)單的換液不合適，因?yàn)榧?xì)胞有可能處于缺營(yíng)養(yǎng)的狀態(tài)；另外一種需要換液情況就是細(xì)胞狀態(tài)欠佳的時(shí)候，可以用PBS先洗滌一下，再更換*培養(yǎng)液，去除那些死細(xì)胞和漂浮的狀態(tài)不好的細(xì)胞，可以調(diào)節(jié)一下細(xì)胞狀態(tài)。2.可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不建議。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，而且經(jīng)過(guò)一定時(shí)間馴化，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞都有...

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人P16蛋白酶聯(lián)免疫檢測(cè)

人P16蛋白酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于雙抗體夾心技術(shù)原理，來(lái)檢測(cè)人P16蛋白，只能用于研究用途，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。用途：用于人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中P16蛋白的測(cè)定。工作原理本試劑盒采用的是雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定樣品中人P16蛋白的水平。向預(yù)先包被了人P16蛋白單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入P16蛋白，溫育；洗滌后，加入HRP標(biāo)記過(guò)的P16蛋白抗體。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶，然后加入底物A、B，產(chǎn)生藍(lán)色...

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解析凋亡細(xì)胞的吞噬降解過(guò)程

來(lái)自北京大學(xué)，北京生命科學(xué)研究所NIBS的研究人員報(bào)道了線(xiàn)蟲(chóng)RAB-2,RAB-7和RAB-14在凋亡細(xì)胞降解過(guò)程中的順序作用，解析了吞噬小體的形成和成熟以及凋亡細(xì)胞的降解過(guò)程。在細(xì)胞凋亡后，凋亡細(xì)胞會(huì)被臨近細(xì)胞或?qū)ｉT(mén)的吞噬細(xì)胞識(shí)別并吞噬降解。目前，關(guān)于已被吞噬的凋亡細(xì)胞如何被降解的分子機(jī)制仍知之甚少。通過(guò)遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等實(shí)驗(yàn)方法王曉晨實(shí)驗(yàn)室在線(xiàn)蟲(chóng)中克隆得到了基因rab-14，它是人類(lèi)基因RabGTPase14在線(xiàn)蟲(chóng)中的同源基因。王曉晨研究組主要的研究方向是運(yùn)用特異的正向...

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大鼠胰島素受體α（ISR-α）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

檢測(cè)范圍：96T3IU/L-80IU/L使用目的：本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素受體α（ISR-α）含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠胰島素受體α（ISR-α）水平。用純化的大鼠胰島素受體α（ISR-α）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入胰島素受體α（ISR-α），再與HRP標(biāo)記的胰島素受體α（ISR-α）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并...

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發(fā)現(xiàn)Toll樣受體4（TLR4）在代謝調(diào)控中發(fā)揮重要作用

近日，《糖尿病》在線(xiàn)發(fā)表了中科院上海生命科學(xué)研究院營(yíng)養(yǎng)所樂(lè)穎影研究組與秦瑩研究組的合作研究論文RegulationoffastingfuelmetabolismbyToll-likereceptor4。該項(xiàng)工作主要由樂(lè)穎影研究組博士研究生龐珊珊等完成。該項(xiàng)研究通過(guò)觀(guān)察TLR4基因敲除對(duì)饑餓條件下代謝反應(yīng)的影響，發(fā)現(xiàn)TLR4基因敲除小鼠與野生型小鼠相比，饑餓時(shí)產(chǎn)生了嚴(yán)重的低血糖、血液和骨骼肌脂類(lèi)水平升高。進(jìn)一步的研究顯示，TLR4通過(guò)調(diào)控骨骼肌中丙酮酸脫氫酶復(fù)合體的活性來(lái)控制糖...

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“嫁接”人體免疫干細(xì)胞

移植進(jìn)實(shí)驗(yàn)鼠的細(xì)胞存活在其免疫系統(tǒng)中。雖然實(shí)驗(yàn)鼠通常能抵抗有害的、導(dǎo)致傷寒的沙門(mén)氏菌種，但是細(xì)菌能夠在那些接受了人體細(xì)胞移植的實(shí)驗(yàn)鼠體內(nèi)繁殖。美國(guó)華盛頓大學(xué)科學(xué)家9月22日表示，他們新近開(kāi)發(fā)的實(shí)驗(yàn)室模型有望幫助尋找到更好治療和預(yù)防傷寒的途徑。據(jù)悉，科學(xué)家是將取自人體臍帶血中的免疫干細(xì)胞移植到易感染疾病的實(shí)驗(yàn)鼠內(nèi)后建立起該實(shí)驗(yàn)室模型的。研究人員證明，人類(lèi)形成血液的細(xì)胞“嫁接”進(jìn)免疫缺乏的實(shí)驗(yàn)鼠后，能夠讓其被能引起人類(lèi)傷寒的生物所感染，傷寒細(xì)菌明顯地在實(shí)驗(yàn)鼠內(nèi)的人體細(xì)胞中繁殖。研...

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小鼠胚胎干細(xì)胞可分化成小腦神經(jīng)細(xì)胞

日本理化研究所13日發(fā)布新聞公報(bào)稱(chēng)，該所研究人員成功誘導(dǎo)小鼠胚胎干細(xì)胞，有選擇性地分化成小腦神經(jīng)細(xì)胞，且實(shí)現(xiàn)了較高的分化效率。理化研究所發(fā)展生物學(xué)研究中心的研究小組，改進(jìn)了此前培育大腦神經(jīng)細(xì)胞的無(wú)血清浮游培養(yǎng)法，開(kāi)發(fā)出一種能在試管內(nèi)再現(xiàn)胚胎發(fā)育過(guò)程中小腦發(fā)育環(huán)境的新方法。公報(bào)說(shuō)，小腦皮質(zhì)中層內(nèi)的浦肯雅細(xì)胞是掌管運(yùn)動(dòng)和學(xué)習(xí)的主要神經(jīng)細(xì)胞，在醫(yī)學(xué)方面具有相當(dāng)重要的作用，以往誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞有選擇性地分化成浦肯雅細(xì)胞的方法效率低下，只有約0.5％的胚胎干細(xì)胞終能分化成浦肯雅細(xì)胞。在實(shí)...

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揭示脫落酸替代小分子的功能及選擇性機(jī)理

脫落酸（Abscisicacid,ABA）是植物中為重要的激素之一，它與植物生長(zhǎng)發(fā)育和抗逆抗旱等生理過(guò)程都有極為密切的關(guān)系。2009年4月，美國(guó)和歐洲的兩個(gè)研究組獨(dú)立發(fā)現(xiàn)了一類(lèi)被命名為PYR1/PYL/RCAR的蛋白可能為ABA受體。同年秋，顏寧教授的研究組和美國(guó)、日本、歐洲的其他四個(gè)研究組分別利用結(jié)構(gòu)生物學(xué)和生物化學(xué)方法獨(dú)立證實(shí)了這類(lèi)蛋白就是ABA受體，并且揭示了其作用分子機(jī)制。ABA受體的發(fā)現(xiàn)與結(jié)構(gòu)生物學(xué)鑒定被Science雜志評(píng)為2009年度突破之一。近期的Journa...

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