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WB實(shí)驗(yàn)(蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)),是一項(xiàng)通過凝膠電泳按照分子量大小分離蛋白,然后再利用特異性抗體識別這些蛋白的技術(shù),它是對蛋白進(jìn)行定性和相對定量的重要檢測方法。盡管絕大多數(shù)研究僧在接觸該實(shí)驗(yàn)時(shí)都會(huì)被虐的體無完膚,卻也在和WB斗志斗勇的過程中積累了不少經(jīng)驗(yàn)。正所謂前人種樹,后人乘涼,現(xiàn)在中索萊寶就把前輩做WB實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)起來,希望對大家能有所幫助。一、關(guān)于蛋白提?。?、裂解buffer:每種裂解buffer都有其擅長的用途,除了這些裂解buffer以外,為了防止蛋白降解、去磷酸化...
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實(shí)驗(yàn)室耗材是專業(yè)院校或醫(yī)療單位的檢驗(yàn)檢測部門、第三方的獨(dú)立檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)以及其他的實(shí)驗(yàn)室開展實(shí)驗(yàn)工作的常用物品。主要是指完成檢驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目過程中的標(biāo)本采集裝置、標(biāo)本盛放裝置以及實(shí)現(xiàn)標(biāo)本檢測的提取、分杯、比色等工作的裝置;其本質(zhì)的特點(diǎn)就是一次性使用,主要為一次性塑料制品。實(shí)驗(yàn)室耗材發(fā)展趨勢一、市場規(guī)模和銷量持續(xù)擴(kuò)大在國家政策的鼓勵(lì)下,中國生命科學(xué)研究領(lǐng)域?qū)⒖焖侔l(fā)展,產(chǎn)生更多生物實(shí)驗(yàn)室用品的需求,不斷推動(dòng)生物實(shí)驗(yàn)室耗材行業(yè)快速發(fā)展。未來,生物實(shí)驗(yàn)室耗材企業(yè)將不斷提升產(chǎn)能,同時(shí)也有更...
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酸性蛋白酶(ACP)是在酸性環(huán)境下作用于蛋白質(zhì)肽鍵的一類蛋白酶,可將蛋白質(zhì)水解為氨基酸、多肽以及游離氨基酸。該酶能夠在低pH條件下有效水解蛋白質(zhì),在酒精發(fā)酵、食品加工、釀造、飼料添加、皮革加工等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。酸性蛋白酶能夠在酸性條件下,催化酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸,酪氨酸在堿性條件下能夠還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán),產(chǎn)物在680nm處具有特征吸收峰,通過吸光值變化即可表征酸性蛋白酶的活性。為了使測定結(jié)果有較高的靈敏度和準(zhǔn)確度,如何選擇較適宜的測量條件?⑴選擇適當(dāng)?shù)臏y量波長。一般根...
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在流式細(xì)胞檢測技術(shù)發(fā)展的幾十年中,熒光成為了其發(fā)展軌跡上重要代名詞之一。在流式細(xì)胞檢測實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)用各種熒光素標(biāo)記抗體是必不可少的。那么常用的流式熒光染料有哪些呢?一、有機(jī)小分子這類染料是具有歷史、應(yīng)用廣泛且相對較小的熒光化合物。有了國外研究基礎(chǔ),國內(nèi)公司也陸續(xù)開始擁有自己專屬染料。二、藻膽蛋白從各種藻類中提取的大蛋白分子。與化學(xué)合成熒光染料相比,藻膽蛋白熒光量子產(chǎn)率超過90%、具備相對高的消光系數(shù),且能夠發(fā)出強(qiáng)烈熒光信號。在聚合物染料沒出現(xiàn)之前,PE和APC是亮的染料,也是搭...
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人抗胰蛋白酶elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠丙二醇(SDA)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。人抗胰蛋白酶elisa試劑盒樣本處理及要求:一、血清將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融...
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分子診斷是以核酸作為檢測對象,主要應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室各類疾病的診斷中,如腫瘤、感染、遺傳等,而核酸提取是分子診斷實(shí)驗(yàn)的“開始”。幾乎所有實(shí)驗(yàn)均是以核酸提取為基礎(chǔ),無論后續(xù)的克隆、PCR、qPCR、建庫、測序等都需要核酸提取以后才能順利進(jìn)行。核酸提取純化質(zhì)量是保證核酸檢測數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的前提,也是分子診斷行業(yè)發(fā)展的前提。核酸提取又叫核酸提取純化,簡單點(diǎn)就是裂解+純化。裂解就是通過溫度以及試劑將樣本中的核酸游離在裂解液體系的過程。純化就是使核酸與裂解體系中的其他雜質(zhì)成分比如蛋白質(zhì),鹽等...
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甲苯胺藍(lán)是一種常用的人工合成染料,屬于醌亞胺染料類。這類染料主要含有胺基和醌型苯環(huán)兩個(gè)發(fā)色團(tuán),從而成色原顯色。甲苯胺藍(lán)中的陽離子有染色作用,組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽離子相結(jié)合而被染色。甲苯胺藍(lán)不僅含有兩個(gè)發(fā)色團(tuán),還含有兩個(gè)助色團(tuán),能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類,幫助發(fā)色團(tuán)對組織產(chǎn)生染色力,使切片上的組織細(xì)胞著色,可染細(xì)胞核使之呈藍(lán)色;甲苯胺藍(lán),為堿性染料,可染細(xì)胞核使之呈藍(lán)色;肥大細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有肝素和組織胺等異色性物質(zhì)遇到甲苯胺藍(lán)可呈異染性紫紅色。甲苯胺藍(lán)染色液用于肥大細(xì)胞的染...
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單道移液器是一種用于定量轉(zhuǎn)移液體的器具,被廣泛用于生物、化學(xué)等領(lǐng)域和臨床診斷實(shí)驗(yàn)室,生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)室,藥學(xué)和化學(xué)實(shí)驗(yàn)室,環(huán)境實(shí)驗(yàn)室,食品實(shí)驗(yàn)室的一種常用工具。一個(gè)完整的移液循環(huán),包括吸頭安裝——容量設(shè)定——吸液放液——卸去吸頭等步驟。每一個(gè)步驟都有需要遵循的操作規(guī)范。1、吸頭安裝對于單道移液器,移液器末端垂直插入吸頭,輕壓左右微微轉(zhuǎn)動(dòng)即可上緊;對于多道移液器,移液器對準(zhǔn)吸頭,傾斜插入,前后稍許搖動(dòng)上緊即可。不可反復(fù)撞擊移液器來確保吸頭氣密性,長期以這種方式裝配吸頭,會(huì)導(dǎo)致移液器...
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