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AP標記抗體稀釋液適用于免疫組織化學與免疫印跡等實驗中AP標記抗體的稀釋。稀釋液中添加了抗體保護劑和穩(wěn)定劑等成分,有效增加了稀釋后AP標記抗體的穩(wěn)定性。傳統(tǒng)的抗體稀釋液常用的有:脫脂奶粉、TBST、PBST、BSA、市售的抗體稀釋液。在選擇抗體稀釋液需要注意的問題有哪些呢?1、脫脂奶粉不能用于磷酸化蛋白,保存時間短,顏色變綠,要更換新的抗體,昂貴的抗體不建議使用。2、PBST不能用來稀釋堿性磷酸酶(AP)標記的抗體,含AP標記的二抗不能使用PBST稀釋。3、抗BSA的抗體不能...
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GUS(β-Galactosidase)基因是存在于E.coli等一些細菌基因組內的編碼β-葡萄糖苷酸酶的一種水解酶,該基因常作為融合標記用于植物轉基因分析和調控研究中。GUS染色的實驗目的是對植物樣本進行染色,因為絕大多數(shù)植物細胞內不存在內源GUS活性,因此GUS基因廣泛用作轉基因植物的報告基因。GUS染色液是β-葡萄糖苷酶基因染色試劑盒(β-GalactosidaseReporterGeneStainingKit)的簡稱。GUS染色液染色原理是適宜的反應條件下,β-葡萄糖...
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SOC液體培養(yǎng)基是分子生物學常用的大腸桿菌培養(yǎng)基,與LB培養(yǎng)基相比,SOC培養(yǎng)基中含有兩倍多蛋白胨,蛋白胨中富含氨基酸及多肽。另外,SOC培養(yǎng)基中含有鎂離子,鎂離子是高密度培養(yǎng)必須的離子。利用培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌在普通條件(250rpm)下?lián)u瓶培養(yǎng),菌濃可達到OD6003-5左右,如果提高轉速到350rpm,OD600能夠達到10-15。那么SOC培養(yǎng)基與SOB培養(yǎng)基有什么區(qū)別呢?SOB培養(yǎng)基配方如下:2.0%胰蛋白胨、0.5%酵母提取物、10mM氯化鈉、2.5mM氯化鉀、10...
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蛋白Marker試劑是一些純化較好的蛋白混合物,通過與染料共價偶聯(lián),在電泳過程中或者轉膜時可以直接觀察到。預染Marker的出現(xiàn)方便了我們的實驗,這種蛋白分子量標準可以幫助我們在電泳時,電泳后,以及轉膜后檢測電泳情況和估計遷移率。本產(chǎn)品由跨度從10~180kDa的10種純化的天然蛋白混合而成,各條帶濃度約為0.2~0.4mg/ml。其中70kD條帶為橙色,10kD為藍色和黃色條帶混合物,其余條帶為藍色,10kD條帶在15%以下膠濃度時10kD為深綠色。蛋白Marker試劑適合...
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人抗胰蛋白酶elisa試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中重組胰蛋白酶水平。用純化的重組胰蛋白酶抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入重豬胰蛋白酶,再與HRP標記的重豬胰蛋白酶抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成...
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在實驗研究中用得比較多的是什么呢?有人覺得是病毒,有人想到了質粒,也有人腦海里浮現(xiàn)出了某種動物:小鼠、大鼠…但是,無論怎樣,都必然繞不開常用的細胞,它可以說是生物實驗研究的道路上親密的伙伴。但是這個伙伴可不太好伺候,即使我們自己廢寢忘食、挨餓受凍地做著科研,也一定要給這位小伙伴*適宜的條件。不過呢,縱使我們煞費苦心地為它提供優(yōu)渥的生長壞境,然而很多時候實驗效果仍然不理想。有什么辦法可以檢測細胞活力情況呢?使用細胞檢測試劑保護好“科研小伙伴”,方可確??蒲械臏蚀_性!細胞活力檢測...
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在實驗室的裝備和用品的采購中,難采購的就是各類耗材。這些實驗室耗材的價值雖然沒有精密儀器高,但對實驗室運行起著*的作用。那么實驗室該如何對采購的耗材進行驗收和質檢呢?一、實驗室耗材的檢收:1、外包裝檢查:包裝應完整無損無污,標識清楚——廠家名稱,品名,批準文號,生產(chǎn)日期,有效期等。2、內包裝檢查:內包裝是否有破損,泄漏,內容物是否齊全,是否有相應的使用說明書等。3、上述檢查在到貨時完成,同時進行記錄:分類存放于試劑儲備區(qū)。二、質檢程序(以檢測離心管為例):1、檢測離心管目測:...
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面對紛繁復雜的樣本,每天的核酸提取可以說是費時費力。如果短時間內想穩(wěn)定拿到實驗結果,那么快速、穩(wěn)定的提取方法就顯得十分重要。提取過程中需要注意的細節(jié)較多,一處出錯都會導致結果的失敗。常見的問題主要有產(chǎn)物得率低,產(chǎn)物降解或者試劑殘留。針對這些問題,下文整理給出了具體的應對方法,幫助大家避坑。一、提取的核酸得率低1、樣品量與試劑的配比要控制在一定范圍,避免超過裂解能力;2、破碎研磨的步驟處理細節(jié)很重要,一定要充分研磨,這是核酸提取的首要條件;3、在洗脫的步驟,使用足量的洗脫液洗脫...
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