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WB實驗流程樣本制備的步驟關(guān)于樣本采集和保存,蛋白提取的相關(guān)知識和技巧請查看:接下來,讓小編帶您總結(jié)關(guān)于蛋白定量和蛋白變性相關(guān)的知識點:一蛋白定量測定蛋白常用的方法有Bicinchoninicacid(BCA)法、Lowry法和Bradford法(考染法)1.BCA法的測定原理是蛋白質(zhì)將銅離子還原成亞銅離子,后者在堿性溶液中與BCA結(jié)合生成紫紅色結(jié)合物,該復(fù)合物在562nm處有吸光值且與蛋白質(zhì)濃度成正相關(guān)性,據(jù)此可測定蛋白質(zhì)濃度。考馬斯亮藍(lán)在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488...
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腫瘤是一種復(fù)雜難治的疾病,對人類健康存在重大威脅。當(dāng)腫瘤體積超過2-3mm3時,腫瘤的增殖、轉(zhuǎn)移與擴(kuò)散主要依靠自身的血管系統(tǒng)來提供必要的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)。而在缺乏血管的情況下,腫瘤具有自限性生長的特點。因此,將腫瘤血管作為靶點,抑制它的形成或破壞其存在,直接切斷腫瘤增殖與轉(zhuǎn)移的營養(yǎng)通道,是一個有吸引力的治療策略。目前,根據(jù)作用機制的不同,血管靶向藥物(VTAs)主要包括兩大類:血管生成抑制劑(AIs)和血管阻斷劑(VDAs)。在VDAs中,康普瑞汀(CA4)作為常用的小分子血管...
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單細(xì)胞蛋白分析是一條可以更深入的了解免疫應(yīng)答、信號傳導(dǎo)、靶向治療的途徑。微流控芯片和免疫分析的出現(xiàn)為單細(xì)胞蛋白質(zhì)組學(xué)的研究提供了新平臺。單細(xì)胞免疫印跡法(scWB)是一種可對單細(xì)胞表面、胞內(nèi)和核內(nèi)蛋白質(zhì)進(jìn)行多重檢測的方法。它結(jié)合了基于微芯片的十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳方法(SDS-PAGE)和凝膠內(nèi)蛋白質(zhì)光捕獲及免疫探針方法。然而,由于原位免疫印跡的特殊性,scWB常常無法檢測低豐度的蛋白質(zhì)。凝膠內(nèi)免疫探測的成功在很大程度上取決于蛋白質(zhì)的固定化效率。目前,一種典型的光...
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核酸提取試劑適用于從樣本中提取細(xì)菌、病毒、寄生蟲的基因組核酸DNA和RNA。專為96孔板自動化平臺而設(shè)計,可幫助實驗者顯著提升樣本提取的通量。工作原理:該試劑采用*磁珠和緩沖液系統(tǒng),磁珠表面修飾有特殊化學(xué)基團(tuán),在一定條件下對DNA/RNA具有很強的富集能力,當(dāng)條件改變時有可以可逆的釋放DNA/RNA,從而達(dá)到快速分離純化DNA/RNA的目的,并可去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。提取所得的高質(zhì)量核酸可用于PCR、RT-PCR、基因測序等系列實驗。磁珠法核酸提取試劑的優(yōu)勢:磁珠法DNA提取是納...
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銀杏雙黃酮又叫白果雙黃酮,在室溫下穩(wěn)定,溶于丙酮,乙酸乙酯,微溶于石油醚、水。具有抑制磷脂酶A2活性,并能抑制前炎癥基因表達(dá)的影響,也可抑制慢性皮膚炎癥活性。銀杏雙黃酮是銀杏葉提取物,主要含銀杏黃酮苷。銀杏黃酮苷能擴(kuò)張腦血管,促進(jìn)腦血液循環(huán),增加腦血流量,改善和保護(hù)腦細(xì)胞;改善缺氧細(xì)胞的能量代謝和營養(yǎng);提高紅細(xì)胞SOD活性,抑制細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化;抗血小板凝集,防止血栓形成;擴(kuò)張冠脈血管,增加冠脈循環(huán)血流量,緩解血管的痙攣。銀杏雙黃酮的檢測方法有下面2種:(1)TLC檢測方法:...
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免疫組織化學(xué)(簡稱免疫組化)是組織化學(xué)的一種,它是利用已知的特異性抗體與抗原能特異性結(jié)合的特點,通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記于結(jié)合后的特異性抗體上的顯示劑,如酶、金屬離子、同位素等,顯示一定的顏色,并借助顯微鏡觀察其顏色的變化,從而在抗原抗體結(jié)合部位確定組織、細(xì)胞結(jié)構(gòu)的化學(xué)成份或化學(xué)性質(zhì)。實驗過程包括切片制作(固定,脫水,透明,包埋,切片,貼片,烤片),脫蠟,水化,阻斷,抗原修復(fù),封閉,一抗孵育,二抗孵育,顯色,復(fù)染,封片,分析。IHC是一項具有挑戰(zhàn)性的應(yīng)用技術(shù),應(yīng)用過程中常出現(xiàn)各種問...
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在免疫抑制的TME中,高水平的乳酸通過促進(jìn)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAM)表型向M2型極化和抑制CD8+T細(xì)胞活性來促進(jìn)腫瘤細(xì)胞免疫逃逸。因此,腫瘤源性乳酸作為免疫抑制TME的免疫調(diào)節(jié)因子,是未來有潛力的腫瘤免疫治療靶點。作為一種單羧酸轉(zhuǎn)運體(MCT),沉默MCT-4的表達(dá)可以增加細(xì)胞內(nèi)乳酸含量來誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,并降低細(xì)胞外乳酸含量來調(diào)節(jié)TME。聯(lián)合化療和抑制乳酸外排可能具有良好的體內(nèi)抗腫瘤療效。響應(yīng)谷胱甘肽(GSH)的生物可降解介孔有機硅納米顆粒(MONs)是抗癌藥物傳遞的候選...
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