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細胞爬片制備詳細過程

細胞爬片制備詳細過程【爬片的準備】1.爬片可用一般的蓋玻片，也可用爬片；2.應用蓋玻片，可根據(jù)自己的需要剪裁成合適的大小，以備置于6孔板、12孔板或24孔板；裁剪時可用前護士輸液用于打開玻璃安瓶的小沙輪，或者是口腔科的那種小沙輪，輕輕劃一下后，稍用力一掰就分開了。如果接種大皿的話，我一般不將蓋玻片切開，直接清潔后放入培養(yǎng)皿中，到染色時再將之切開，這樣既保證了細胞均一性，又可同時做幾個指標的染色。3.將剪裁好的爬片，置于濃硫酸中浸泡并過夜，第二天先用自來水沖洗20遍，再置于無水...

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抗熒光衰減封片劑（含DAPI）和不含DAPI的區(qū)別

抗熒光衰減封片劑（含DAPI）和不含DAPI的區(qū)別抗熒光衰減封片劑是一種用于減緩熒光衰減的封片試劑。以甘油為基礎，加入抗熒光衰減劑，有強烈的抗熒光衰減作用，用于對熒光組織和細胞樣品的封片。封片后，樣品4℃或者-20℃避光可保存2-3周。在封片時用移液槍滴一滴抗熒光衰減封片液，蓋上蓋玻片就可以了。封片劑含細胞核DNA熒光染料DAPI，使實驗操作更簡便；封片劑干燥后會形成一層牢固的涂層，光學透明，非常便于后續(xù)觀察、拍照與儲存。DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-d...

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胎牛血清使用中的常見問題及解決方法

胎牛血清使用中的常見問題1、如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲存血清，并避免反復凍融。我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷...

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提取DNA的方法總結(jié)與比較

提取DNA的方法總結(jié)與比較DNA提取是一項經(jīng)常要做的實驗，下面我們就總結(jié)了四種dna提取方法并做詳細說明和比較。一.濃鹽法提取DNA：A.利用RNA和DNA在電解溶液中溶解度不同，將二者分離，常用的方法是用1M氯納提取化鈉抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的三氯甲烷一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質(zhì),此時蛋白質(zhì)凝膠停留在水相及三氯甲烷相中間，而DNA位于上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將DNA鈉鹽沉淀出來.B.也可用0.15MNaCL液反復洗滌細胞破碎液除去RNP,再以1...

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幾種核酸染料的比較

幾種核酸染料的比較1、EB（溴化乙錠）溴化乙錠是一種高度靈敏的嵌入性熒光染色劑，為強致癌誘變劑，但價格便宜。它與DNA的結(jié)合幾乎沒有堿基序列特異性。在高離子強度的飽和溶液中，大約每2.5個堿基插入一個溴化乙錠分子。EB的這種特性使其成為一種核酸染料，常用于瓊脂糖凝膠電泳中的核酸染色。溴化乙錠在紫外區(qū)302nm和366nm處有吸收峰，在紫外光的照射下，溴化乙錠可被激發(fā)出橙紅色的熒光（590nm）。結(jié)合有DNA的溴化乙錠復合物的熒光強度要比沒有結(jié)合DNA的染料高出20-30倍，因...

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細胞核提取的方法介紹

一、單細胞核提取的方法1.Ficoll分層液法Ficoll分層液法是一種單次密度梯度離心分離法.聚蔗糖－泛影葡胺是一種較理想的細胞分層液，其主要成分是一種合成的蔗糖聚合物稱聚蔗糖（商品名為Ficoll）,分子量為40kD,具有高密度、低滲透壓、無毒性的特點.高濃度的Ficoll溶液粘性高,易使細胞聚集,故通常使用60g/L的低濃度溶液,密度為1.020,添加比重為1.200的泛影葡胺（urografin）以增加密度.國外常用商品Isopaque或Hypaque,故又稱Fico...

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Hoechst-細胞調(diào)亡

細胞凋亡是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡。細胞凋亡與細胞壞死不同，細胞凋亡不是一件被動的過程，而是主動過程，它涉及一系列基因的激活、表達以及調(diào)控等的作用；它并不是病理條件下，自體損傷的一種現(xiàn)象，而是為更好地適應生存環(huán)境而主動爭取的一種死亡過程。細胞發(fā)生凋亡時，就像樹葉或花的自然凋落一樣，對于這種生物學觀察，借臘“Apoptosis”來表示，意思是像樹葉或花的自然凋落，可譯為細胞凋亡。其實從嚴格的詞學意義上來說，細胞程序性死亡與細胞凋亡是有很大區(qū)別的。細胞...

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DH5α感受態(tài)細胞

DH5α感受態(tài)細胞品牌：Solarbio|貨號：C1100本公司生產(chǎn)的DH5α感受態(tài)細胞是采用大腸桿菌DH5α菌株經(jīng)特殊工藝制備得到，可用于DNA的化學轉(zhuǎn)化。使用pUC19質(zhì)粒檢測，轉(zhuǎn)化效率可達108，-70℃保存3-5個月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變?；蛐?supE44△lacU169（φ80lacZ△M15）hsdR17recA1endA1gyrA96thi-1relA1特點:一種用于鋪制與培養(yǎng)質(zhì)粒平板和粘粒平板的重組缺陷的抑制型菌株。其φ80lacZ△M15基因的產(chǎn)物可與pUC...

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