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膜再生液的配制方法以及注意事項(xiàng)

膜再生液可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后，可以使用不同的抗體進(jìn)行下一輪WesternBlot實(shí)驗(yàn)。一般stripping的原理都是利用蛋白變性以及利用beta-mercaptoethanol打開-s-s-，使一抗二抗解聚變性而被洗去，但洗脫的強(qiáng)度是一個(gè)關(guān)鍵，小了抗體洗不干凈影響re-probe，大了又造成抗原的損失。膜再生液的配制：方法一：需要50℃溫?。㏒trippingBuffer:β-mercaptoethanol342μl；20%SDS5ml；1MT...

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4%多聚甲醛怎么配

多聚甲醛(Paraformalclehyde)又稱固體甲醛，是一類線型短鏈的聚氧甲撐二醇HO(CH2O)nH(式中的n=8--100)混合物，其中還含有少量水份和甲醇。多聚甲醛性狀為甲醛的固體聚合物。白色無定型粉末，有辛辣氣味。其配制方法如下：（1）4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸緩沖液（pH7.3）試劑：多聚甲醛40g0.1mol/L磷酸緩沖液1000ml配制方法：稱取40g多聚甲醛，置于三角燒瓶中，加入500～800ml0.1mol/L磷酸緩沖液（PhosphateBu...

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電極緩沖液中甘氨酸的作用

甘氨酸同Tris（三羥甲基氨基甲烷）一起組成電泳緩沖液中的緩沖對(duì)，可以穩(wěn)定電泳過程中的PH值。在SDS-PAGE不連續(xù)電泳中，制膠緩沖液使用的是Tris-HCL緩沖系統(tǒng)，濃縮膠是pH6.7，分離膠pH8.9;而電泳緩沖液使用的Tris-甘氨酸緩沖系統(tǒng)。在濃縮膠中，其pH環(huán)境呈弱酸性，因此甘氨酸解離很少，其在電場(chǎng)的作用下，泳動(dòng)效率低;而CL離子卻很高，兩者之間形成導(dǎo)電性較低的區(qū)帶，蛋白分子就介于二者之間泳動(dòng)。由于導(dǎo)電性與電場(chǎng)強(qiáng)度成反比，這一區(qū)帶便形成了較高的電壓梯度，壓著蛋白質(zhì)...

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Parafilm封口膜怎么使用

Parafilm封口膜具有柔軟性，可塑性，防止水分流失，自動(dòng)密封性，無味，容易切割，熱塑性塑料，半透明，無色等特點(diǎn)。可以快速有效地密封實(shí)驗(yàn)器皿。具有防水防濕的性能，有效阻止樣品發(fā)揮和污染。有效保護(hù)無水物質(zhì)。可以重復(fù)折疊使用，纏繞在尖銳外形物體上也不會(huì)被撕裂。具有良好韌性，21℃時(shí)也可拉伸接近兩倍的長(zhǎng)度。隨溫度身高，繞韌性和柔軟度相應(yīng)提升。不耐高溫，68℃時(shí)將會(huì)軟化具有粘性。物理性質(zhì):Parafilm封口膜是半透明的，有柔性的，熱塑性塑料，高性能防水材料，本身為無色，無嗅，無味...

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植物蛋白質(zhì)提取方法總匯

植物蛋白質(zhì)提取方法總匯植物蛋白是蛋白質(zhì)的一種，來源是從植物里提取的，營(yíng)養(yǎng)與動(dòng)物蛋白相仿，但是更易于消化。含植物蛋白豐富的是大豆。但在飲食中，植物蛋白和動(dòng)物蛋白要搭配食用。植物蛋白盡管一般不如動(dòng)物蛋白好，但仍是人類膳食蛋白質(zhì)的重要來源。谷類一般含蛋白質(zhì)6%-10%，不過其中必需氨基酸種或多種含量低（限制氨基酸）。薯類含蛋白質(zhì)2%-3%。某些堅(jiān)果類如花生、核桃、杏仁和蓮子等則含有較高的蛋白質(zhì)（15%-30%）。豆科植物如某些干豆類的蛋白質(zhì)含量可高達(dá)40%左右。特別是大豆在豆類中更...

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轉(zhuǎn)鐵蛋白應(yīng)用

轉(zhuǎn)鐵蛋白（Transferrin）Cas；11096-37-0轉(zhuǎn)鐵蛋白是血液中一種主要的糖蛋白,負(fù)責(zé)將肝組織(是鐵貯藏的主要場(chǎng)所)的鐵向其它組織的細(xì)胞運(yùn)輸。沒有結(jié)合鐵的轉(zhuǎn)鐵蛋白稱作脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白(apotransferrin),它能夠緊緊結(jié)合兩個(gè)Fe3,此時(shí)稱為鐵結(jié)合轉(zhuǎn)鐵蛋白(ferrotransferrin)。所有生長(zhǎng)中的細(xì)胞表面都有鐵結(jié)合轉(zhuǎn)鐵蛋白的受體,在中性pH條件下轉(zhuǎn)鐵蛋白與鐵結(jié)合,然后通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。在細(xì)胞內(nèi),在內(nèi)體的酸性環(huán)境下,轉(zhuǎn)鐵蛋白釋放出鐵,但是仍與膜受體...

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RNAwait（非凍型組織RNA保存液）

RNAwait是一種無毒的可直接使用的樣品儲(chǔ)存液，能使細(xì)胞內(nèi)的RNA與RNA酶分離，可以快速可靠地保存動(dòng)物組織、細(xì)胞內(nèi)的RNA。組織獲取后立即浸入RNAwait保存液中，在室溫可以保存7天，4℃可以保存4周，-20℃、-80℃標(biāo)本可以長(zhǎng)期保存，RNA穩(wěn)定存在不降解，取出后用各類方法抽提可以獲得高質(zhì)量的RNA。操作流程：1.根據(jù)要保存的各樣本的體積，計(jì)算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應(yīng)當(dāng)是組織體積的10倍（如100mg組織約用1mlRNAwait）。2.將RNA...

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Tris飽和酚配制及作用

Tris飽和酚是用Tris-HCl（pH8.0）飽和過的重蒸酚，為淺黃色透明液體，有刺激性氣味，上層為Tris鹽酸緩沖液，pH7.8，下層為酚相，內(nèi)加有抗氧化的8-羥基喹啉。Tris飽和酚用于分離DNA。Tris飽和酚的配置：冰箱取出重蒸酚,室溫放置，之后68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中，以防玻璃炸裂，加8－羥基喹啉0.1％和β－巰基乙醇0.2％,（原液14.4MOL/ML），混勻，溶液呈現(xiàn)黃色，倒入分液漏斗中（也可在燒杯中進(jìn)行）加入等溶劑的1MOL/ML的Tris...

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