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RIPA裂解液的原理

RIPA裂解液(RIPALysisBuffer)對動物細胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強裂解作用，RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等。RIPA裂解液的原理如下：RIPA主要是從動物組織和動物細胞中抽取的可溶性蛋白。RIPA組織/細胞裂解液是利用表面活性劑等來裂解細胞膜（包括核膜）。索萊寶RIPA裂解液的使用方法如發(fā)現(xiàn)RIPA有沉淀，請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。根據(jù)使用量，取每1mlRIPA加入10ulPMSF，使PMSF的終濃度為1m...

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瑞氏染色的步驟

瑞氏染色是目前常用而又簡單的染色方法。瑞氏染液由酸性染料伊紅和堿性染料美藍組成的復(fù)合染料，溶于甲醇，后解離為帶正電的美藍和帶負電的伊紅離子。瑞氏染色的步驟是什么？為了觀察細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，識別各種細胞及異常變化，血涂片必須進行染色。血涂片的各種染色方法大多是羅氏染色法衍變而來。目前常用瑞氏染色法。瑞氏染色的步驟瑞氏染液的配制：取瑞氏染料1.0g、甲醇600ml、甘油15ml。I液：將全部染料放入清潔干燥的乳缽中，先加少量甲醇慢慢地研磨(少半小時)，以使染料充分溶解，再加一些甲醇混...

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瑞氏染色原理及作用

瑞氏染液由酸性染料伊紅和堿性染料美藍組成的復(fù)合染料，溶于甲醇，后解離為帶正電的美藍和帶負電的伊紅離子。瑞氏染色法就是用瑞氏染色液對細菌進行染色。那么瑞氏染色原理是什么？瑞氏染色原理：瑞氏染料是由堿性染料美藍（Methvlemblue）和酸性染料黃色伊紅（EostmY）合稱伊紅美藍染料即瑞氏（美藍－伊紅Y）染料。伊紅鈉鹽的有色部分為陰離子，無色部分為陽離子，其有色部分為酸性，故稱伊紅為酸性染料。美藍通常為氯鹽是堿性的，美藍的中間產(chǎn)物結(jié)晶為三氯化鎂復(fù)鹽，其有色部分為陽離子，無色部...

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瑞氏染色的注意事項有哪些

瑞氏染色法是從經(jīng)典和常用的染色法。是染料透入被染物并存留其內(nèi)部的一種過程，此過程既有物理的吸附作用，又有化學(xué)的親和作用，各種細胞成分化學(xué)性質(zhì)不同，對各種染料的親和力也不一樣。因此，染色后同一血片上各種細胞可以染上各自特征性的顏色。在瑞氏染色的過程中也有一些注意事項。瑞氏染色的注意事項1.血涂片干透后固定，否則細胞在染色過程中容易脫落。2.沖洗時應(yīng)以流水沖洗，不能先倒掉染液，以防染料沉著在血涂片上。沖洗時間不能過久，以防脫色。如血涂片上有染料顆粒沉積，可滴加甲醇，然后立即用流水...

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蛋白marker的作用的解析

蛋白marker的作用是什么，先要要了解一下什么是蛋白marker。在WesternBlot過程中，分子量Marker就像個螺絲釘一樣沒雖然是個小細節(jié)，然而就是這樣一個小細節(jié)對實驗結(jié)果有著不可忽視的作用。蛋白marker的作用：Marker是表面覆蓋有特殊反光材料的標(biāo)記物，常見形狀有球形、半球形。染色體上一個可以被識別的區(qū)域（比如限制性內(nèi)切酶的酶切點，基因的位置等）。標(biāo)記的遺傳能夠被檢測出來。標(biāo)記可以是染色體上有表達功能的部分（比如基因），也可以是沒有編碼蛋白質(zhì)功能但遺傳特性...

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什么是預(yù)染蛋白marker

蛋白marker可分為未預(yù)染的Marker即寬分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)、高分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)以及低分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)以及預(yù)染的Marker即單色預(yù)染和多色預(yù)染。那么，什么是預(yù)染蛋白marker？預(yù)染蛋白marker為一些純化好的蛋白的混合物.這些蛋白混合物與一種藍色染料共價偶聯(lián).可在凝膠電泳時出現(xiàn)強度均勻的8條帶.同未預(yù)染的蛋白marker相比,預(yù)染蛋白marker因與染料共價偶聯(lián)而在SDS-PAGE電泳時的遷移特性發(fā)生某些改變.預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)預(yù)染蛋白分子量是一些純化好的蛋白混合物，通過與...

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幾種磷酸緩沖液的配制方法

磷酸緩沖液也叫做磷酸鹽緩沖液，英文名為PhosphateBuffer，是生物化學(xué)研究中使用為廣泛的一種緩沖液，磷酸緩沖液的配制我們一起來了解一下。先，按照下表所給定的體積，混合1mol/L的磷酸二氫鈉(單堿)和1mol/L磷酸氫二鈉(雙堿)貯液，獲得所需pH的磷酸緩沖液。配制1mol/L的磷酸二氫鈉(NaH2PO4?H2O)貯液：溶解138g于足量水中，使終體積為1L;1mol/L磷酸氫二鈉(Na2HPO4)貯液:溶解142g于足量水中使終體積為1L。1mol/L磷酸二氫鈉(...

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磷酸緩沖液的作用

磷酸緩沖液也叫磷酸鹽緩沖液，是生物化學(xué)研究中使用為廣泛的一種緩沖液，磷酸鹽緩沖液是由磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉組成的溶液，那么磷酸緩沖液具體有哪些作用呢?磷酸緩沖液的作用有哪些?磷酸緩沖液主要用于一些化學(xué)實驗中不影響實驗反應(yīng)的情況下調(diào)節(jié)pH值，以便讓實驗的化學(xué)反應(yīng)在佳條件下進行。部分用于食品或是飼料行業(yè)加工，如食品或者飼料真菌毒素檢驗中Elisa方法的洗板應(yīng)用或者食品微生物檢驗中的稀釋緩沖液。磷酸緩沖液的作用不僅僅如此，僅偽狂犬病毒要用它稀釋，一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋...

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