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Bradford法測(cè)蛋白濃度是利用蛋白質(zhì)-染料結(jié)合的原理,定量地測(cè)定微量蛋白質(zhì)濃度的快速靈敏的方法。Bradford法測(cè)蛋白濃度原理考馬斯亮藍(lán)(CBB)測(cè)定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種??捡R斯亮藍(lán)在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488nm;當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌?,蛋白質(zhì)—色素結(jié)合物在595nm波長(zhǎng)下有大光吸收。其光吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比,因此可用于蛋白質(zhì)的定量測(cè)定。蛋白質(zhì)與考馬斯亮藍(lán)結(jié)合在2min左右的時(shí)間內(nèi)達(dá)到平衡,完成反應(yīng)十分迅速;其結(jié)合物在室溫下1h內(nèi)保持穩(wěn)定。該...
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Bradford法又稱(chēng)考馬斯亮藍(lán)法,是Bradford于1976年建立起來(lái)的一種蛋白質(zhì)濃度的測(cè)定方法。bradford法定量蛋白質(zhì)的原理是馬斯亮藍(lán)(CBB)測(cè)定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種??捡R斯亮藍(lán)在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488nm;以下是bradford法定量蛋白質(zhì)的原理及含量測(cè)定流程bradford法定量蛋白質(zhì)的原理考馬斯亮藍(lán)(CBB)測(cè)定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種??捡R斯亮藍(lán)在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488nm;當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌鞍踪|(zhì)—色素...
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血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。胎牛血清是血清中的一種,是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過(guò)心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清。胎牛血清是品質(zhì)高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分少。胎牛血清的主要作用1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂...
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TBS緩沖液是Tris-HCl緩沖鹽溶液,為等滲鹽溶液加Tris-HCl緩沖液。屬于常規(guī)pH緩沖液,常用于清洗免疫染色的組織或Western?Blot?中的蛋白印跡膜等,是常用分子生物學(xué)試劑。TBS緩沖液(0.05mol/L,pH7.4)主要由Tris、氯化鈉、BSA、防腐劑等組成,可用于免疫金銀染色中清洗組織,亦可作為封閉液的基礎(chǔ)試劑。Tris緩沖鹽水(TBS):10mmol/L,Tris含0.9%NaCl,用1NHC1調(diào)pH7.4;操作步驟(僅供參考):1、石蠟切片脫蠟水...
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PDA培養(yǎng)基作用:PDA(PotatoDextroseAgar(Medium))培養(yǎng)基又稱(chēng)馬鈴薯葡萄糖瓊脂,是一種半合成培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基。宜培養(yǎng)酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。PDA培養(yǎng)基的配制:(僅供參考)(1)稱(chēng)量和熬煮按培養(yǎng)基配方逐一稱(chēng)取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過(guò)濾,濾渣棄取。濾液補(bǔ)充水分到1000ml。(2)加熱溶解把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),...
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果膠酶是一種天然的復(fù)合多糖類(lèi)高分子化學(xué)物,通常包括原果膠酶、果膠甲酯水解酶、果膠酸酶,通過(guò)它們的聯(lián)合作用使果膠質(zhì)得以*分解。由黑曲霉經(jīng)發(fā)酵精制而成,適用于果汁榨取、濃縮過(guò)濾、果汁澄清、膜組織分離。在食品、醫(yī)藥和日用化學(xué)行業(yè)具有廣泛的用途。果膠酶的作用果膠酶由黑曲霉經(jīng)發(fā)酵精制而得。外觀呈淺黃色粉末狀。果膠酶主要用于果蔬汁飲料及果酒的榨汁及澄清,對(duì)分解果膠具有良好的作用。天然的果膠質(zhì)在原果膠酶作用下,轉(zhuǎn)化成水可溶性的果膠;果膠被果膠甲酯水解酶催化去掉甲酯基團(tuán),生成果膠酸;果膠酸經(jīng)...
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木瓜蛋白酶(Papain)簡(jiǎn)稱(chēng)木瓜酶,又稱(chēng)為木瓜酵素。是利用未成熟的番木瓜(Caricapapaya)果實(shí)中的乳汁,采用現(xiàn)代生物工程技術(shù)提煉而成的生物酶制品。木瓜蛋白酶主要作用:食品加工、醫(yī)藥使用、日化洗滌、飼料加工、皮革和紡織等行業(yè);以未成熟的番木瓜乳液為原料,經(jīng)過(guò)生物提取、微濾、冷凍、干燥提煉而成的酶制劑。木瓜蛋白酶的提取方法:(僅供參考)由木瓜的未成熟果實(shí),經(jīng)提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工業(yè)上以粗制品的應(yīng)用為主。木瓜蛋白酶韻生產(chǎn)方法有三種,分別是直接熱風(fēng)烘...
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木瓜蛋白酶(Papain)是一種蛋白水解酶,又稱(chēng)木瓜酶。是利用未成熟的番木瓜(Caricapapaya)果實(shí)中的乳汁,采用現(xiàn)代生物工程技術(shù)提煉而成的生物酶制品。下面來(lái)詳細(xì)介紹一下木瓜蛋白酶活性測(cè)定的方法。木瓜蛋白酶活性測(cè)定:(僅供參考)木瓜蛋白酶活性測(cè)定原理木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而釋出N-苯甲酰-L-精氨酸,其釋出量可用氫氧化鈉液滴定,以此確定酶活力。酶活單位在25℃下,每分鐘內(nèi)能催化分解1umol底物的酶量,稱(chēng)為1單位。試液制備1、底物溶液:準(zhǔn)...
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