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elisa試劑盒檢測原理及主要影響

ELISA檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育，如果其中存在HEVIgM抗體，這些抗體就會(huì)與HEV的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會(huì)與*次孵育結(jié)合上的HEVIgM抗體相結(jié)合，洗板除去未...

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乙酸酐的作用與用途

乙酸酐即無色透明液體。有強(qiáng)烈的乙酸氣味。味酸。有吸濕性。折光率。溶于氯仿和乙*緩慢地溶于水形成乙酸。與乙醇作用形成乙酸乙酯。易燃，其蒸氣與空氣可形成爆炸性混合物，遇明火、高熱能引起燃燒爆炸。與強(qiáng)氧化劑接觸可發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。[1]能使醇、酚、氨和胺等分別形成乙酸酯和乙酰胺類化合物。在路易斯酸存在下，乙酐還可使芳烴或烯徑發(fā)生乙?；磻?yīng)。在乙酸鈉存在下，乙酐與苯甲醛發(fā)生縮合反應(yīng)，生成肉桂酸。緩慢溶于水變成乙酸。與醇作用生成乙酸乙酯。乙酐是重要的乙?；噭音糜谥圃炖w維素乙酸酯；乙...

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酶標(biāo)儀操作事項(xiàng)

酶標(biāo)儀操作事項(xiàng)酶標(biāo)儀的功能是用來讀取酶聯(lián)免疫試劑盒的反應(yīng)結(jié)果，因此要得到準(zhǔn)確結(jié)果，試劑盒的使用必須規(guī)范。許多醫(yī)院在使用酶標(biāo)儀之前是通過目測判斷結(jié)果，操作過程隨意性較大，在使用酶標(biāo)儀后如果不能及時(shí)糾正操作習(xí)慣，會(huì)造成較大誤差。在此上?？婆d商貿(mào)有限公司給大家介紹一下在酶標(biāo)儀的操作中應(yīng)注意以下事項(xiàng)：使用加液器加液，加液頭不能混用。洗板要洗干凈。如果條件允許，使用洗板機(jī)洗板，避免交叉污染。嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作，反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確。在測量過程中，請(qǐng)勿碰酶標(biāo)板，以防酶標(biāo)板傳送時(shí)擠傷操作人...

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細(xì)胞凍存液的配置以及凍存步驟

凍存液先關(guān)鍵在于冷凍保護(hù)劑，一般常用DMSO此類滲透性保護(hù)劑，一般是以9份小牛血清或細(xì)胞培養(yǎng)液與1份的DMSO混合而成，現(xiàn)配現(xiàn)用或配置后放入普通冰箱冰盒內(nèi)冷凍保存，使用前于室溫水浴融化。關(guān)鍵在于DMSO的終濃度為10％，對(duì)于普通細(xì)胞來說，小牛血清濃度似乎高點(diǎn)越好，但沒有這個(gè)必要，用細(xì)胞培養(yǎng)液即可。細(xì)胞凍存1.預(yù)先配制凍存液：10%DMSO+90%胎牛血清，4℃冰箱保存預(yù)冷；2.用胰酶對(duì)細(xì)胞進(jìn)行消化：倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基，PBS沖洗兩次，用胰酶消化...

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小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子1ELISA試劑盒樣本處理及要求

小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子1ELISA試劑盒樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀...

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細(xì)胞的生物電現(xiàn)象

（1）靜息電位及其產(chǎn)生機(jī)制：靜息電位是指細(xì)胞膜處于安靜狀態(tài)下存在于膜內(nèi)外兩側(cè)的電位差。采用細(xì)胞內(nèi)電位記錄地方法所記錄到的電位是以細(xì)胞外為零電位的膜內(nèi)電位，絕大多數(shù)細(xì)胞的靜息電位是穩(wěn)定的負(fù)電位。靜息電位產(chǎn)生的機(jī)制：安靜時(shí)細(xì)胞這種數(shù)值比較穩(wěn)定的內(nèi)負(fù)外正的狀態(tài)稱為極化;（是靜息狀態(tài)的標(biāo)志）以靜息電位為準(zhǔn)若膜內(nèi)電位向負(fù)值增大的方向變化稱為超極化；若膜內(nèi)電位向負(fù)值減少的方向變化稱為去極化；細(xì)胞發(fā)生去極化后向原先的極化方向恢復(fù)稱為復(fù)極化。機(jī)制：①鈉泵主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)造成的細(xì)胞膜內(nèi)、外Na+和K+...

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抗原和抗體濃度

對(duì)于一個(gè)給定的抗原，佳的抗體濃度依賴的抗原和抗體本身?？乖涂贵w的親和力，以及一抗與二抗的特異反應(yīng)都是不同的。優(yōu)抗原和抗體濃度可通過免疫印跡實(shí)驗(yàn)中使用不同濃度的抗原和抗體作用確定。另外，更快和更簡單的方法是進(jìn)行斑點(diǎn)印跡實(shí)驗(yàn)。以下是使用超敏感信號(hào)底物進(jìn)行的斑點(diǎn)印跡的操作方法。1.用TBS和PBS稀釋的蛋白樣品，好的稀釋方法是由樣品中的抗原稀釋濃度決定的，但是由于抗原的濃度是未知的，所以有必要進(jìn)行寬范圍的稀釋度的檢測。SuperSignalWestPic化學(xué)發(fā)光底物的檢測靈敏度可...

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標(biāo)本外源因素對(duì)elisa試劑盒檢測結(jié)果的影響

①標(biāo)本溶m：由于各種原因引起的標(biāo)本溶血，均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放m大量具有過氧化物酶活性的m紅蛋向，在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測定中，會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色，干擾測定結(jié)果J。所以標(biāo)本采集時(shí)必須注意避免溶m。②標(biāo)本受細(xì)菌污染：因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因此，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶標(biāo)本一樣，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。③標(biāo)本保存不當(dāng)：在冰箱中保存過久的標(biāo)本，10}清中IgG可聚合成多聚體、AFP形成二聚體，在間接法ELISA測定中會(huì)導(dǎo)致本底過深，甚造成假...

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