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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法氨基酸代謝系列BC4160-50T/48S脯*酸脫氫酶活性檢測試劑盒 氨基酸代謝

脯*酸脫氫酶活性檢測試劑盒 氨基酸代謝
產(chǎn)品簡介:

儲存條件
-20℃
中文名稱
脯*酸脫氫酶活性檢測試劑盒 氨基酸代謝
有效期
6個月
單位

英文名稱
Proline Dehydrogenase(ProDH) Activity Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品型號:BC4160-50T/48S

更新時間:2024-04-12

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :801

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產(chǎn)品介紹

脯*酸脫氫酶(ProDH)活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號:BC4160
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液一液體60 mL×1瓶2-8℃保存
提取液二液體0.6 mL×1支2-8℃保存
試劑一液體40 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二粉劑×12-8℃保存
試劑三粉劑×12-8℃保存
試劑四粉劑×1-20℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑二:臨用前加入5 mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑2-8℃保存;

  2. 試劑三:臨用前加入4 mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑2-8℃保存;

  3. 試劑四:臨用前加入10 mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑可分裝-20℃保存,避免反復(fù)凍融。

  4. 工作液的配制:首先將試劑三和試劑四配成溶液,臨用前根據(jù)用量按照試劑一(V):試劑二(V):試劑三(V=1.6mL):0.2mL):0.15mL)的比例充分混勻。(注意:現(xiàn)配現(xiàn)用,用多少配多少)

產(chǎn)品說明:
ProDH是存在于線粒體內(nèi)的催化脯*酸降解的關(guān)鍵酶。降低ProDH活性對于調(diào)節(jié)滲透平衡、防止?jié)B透脅迫對植物造成傷害、清除自由基、保護細(xì)胞結(jié)構(gòu)具有重要意義。
ProDH催化脯*酸脫氫生成延丙 酮酸,脫下的氫通過吩嗪二甲酯硫酸(PMS)傳遞還原2,6-二氯 酚靛酚(DCPIP),并且在600nm處具有特征吸收峰,通過600nm吸光度的下降,測定2,6-DCPIP的還原速度,代表ProDH活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品:
天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、丙 酮、勻漿器/研缽、冰、蒸餾水。

操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項:
1、ΔA大于0.6時或者A3大于1.5時建議將樣本上清用蒸餾水稀釋后再進(jìn)行測定。
2、控制A3在0.8以上,若A3小于0.8,建議將樣本上清用蒸餾水稀釋后再進(jìn)行測定。
3、空白管為檢測各試劑組分質(zhì)量的檢測孔,正常情況下,變化不超過0.02。

實驗實例:

  1. 取0.1g稗草加入1mL提取液一進(jìn)行勻漿研磨,對樣本進(jìn)行處理,取上清稀釋2倍,之后按照測定步驟操作,測得計算ΔA測定=A3-A4=0.815-0.52=0.295,ΔA空白=A1-A2=0.883-0.879=0.004ΔA=ΔA測定-ΔA空白=0.295-0.004=0.291,按樣本質(zhì)量計算酶活得ProDH(U/g 質(zhì)量)=333.33×ΔA÷W×稀釋倍數(shù)=333.33×0.291÷0.1×2=1939.981 U/g 質(zhì)量。

  2. 取0.1g兔子腎臟組織加入1mL提取液一進(jìn)行勻漿研磨,對樣本進(jìn)行處理,取上清后按照測定步驟操作,測得計算ΔA測定=A3-A4=0.94-0.619=0.321ΔA空白=A1-A2=0.883-0.879=0.004,ΔA=ΔA測定-ΔA空白=0.321-0.004=0.317,按樣本質(zhì)量計算酶活得ProDH(U/g 質(zhì)量)=333.33×ΔA÷W =333.33×0.317÷0.1=1056.656 U/g 質(zhì)量。

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