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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法淀粉系列BC4260-50T/48S直鏈淀粉含量檢測試劑盒

直鏈淀粉含量檢測試劑盒
產(chǎn)品簡介:

儲存條件
2-8℃
中文名稱
直鏈淀粉含量檢測試劑盒
有效期
6個月
單位

英文名稱
Amylose Content Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品型號:BC4260-50T/48S

更新時間:2024-04-15

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :845

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產(chǎn)品介紹

直鏈淀粉含量檢測試劑
盒說明書

可見分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號:BC4260
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
試劑一液體60 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二液體50 mL×1瓶(自備)2-8℃保存
試劑三液體30 mL×1瓶2-8℃保存
試劑四-2-8℃保存
試劑五液體1.5 mL×1支2-8℃保存
試劑六液體10mL×1支2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品粉劑×12-8℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑二:*50 mL自備;

  2. 試劑四:提供125mL空瓶一個;將試劑三:H2O =9 mL:91 mL混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配,2-8保存半年;

  3. 標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg直鏈淀粉。臨用前加入0.1 mL無水乙醇和0.9 mL試劑三,混勻后封口膜封口,沸水浴至溶解,即10 mg/mL的直鏈淀粉,2-8保存半年。

產(chǎn)品說明:
直鏈淀粉是D-葡萄糖基以α-(1,4)糖苷鍵鏈接的多糖鏈,直鏈淀粉含量影響著食品的食用品質(zhì)和外觀品質(zhì),與食品安全息息相關(guān)。
直鏈淀粉和碘形成藍(lán)色絡(luò)合物,利用乙醇分開樣本中的可溶性糖和淀粉,再用碘與其反應(yīng)得到直鏈淀粉含量。

技術(shù)指標(biāo):
低檢出限:0.006 mg/mL
線性范圍:0.0125-0.6 mg/mL
注意:實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、天平、臺式離心機(jī)、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、*、無水乙醇、EP管、蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn)

  1. 稱取0.01g烘干樣本,加入1mL試劑一,充分勻漿

  2. 80℃水浴提取30min,3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀

  3. 在步驟2沉淀中加入1mL試劑二(*)振蕩 5min;3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀

  4. 在步驟3沉淀中加入5mL試劑四充分溶解,90℃水浴10min,冷卻后3000g,25℃離心5min,取上清待測。

二、測定步驟

  1. 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)雙波長至550nm485nm,蒸餾水調(diào)零。

  2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋:取40μL 10mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液,加入960μL試劑四,充分混勻,配制成0.4mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液使用,現(xiàn)用現(xiàn)配。(實驗中每管需要100μL,為減小實驗誤差,故配制大體積。)

  3. 操作表 (在1.5mL離心管中依次加入下列試劑) :

試劑名稱測定管標(biāo)準(zhǔn)管空白管
樣本(µL)100--
標(biāo)準(zhǔn)溶液(μL-100-
蒸餾水(µL)--100
試劑五(µL)202020
試劑六(µL)202020
蒸餾水(µL)860860860
充分混勻,測定550nm和485nm處的吸光值,550nm下的測定管、標(biāo)準(zhǔn)管、空白管分別記為A測定、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白,485nm下的分別記為A’測定、A’標(biāo)準(zhǔn)、A’空白,計算ΔA測定=A測定-A空白)-A’測定-A’空白),ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)-A’標(biāo)準(zhǔn)-A’空白)。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測1-2次。

三、直鏈淀粉含量計算
直鏈淀粉含量(mg/g 質(zhì)量)=ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo)準(zhǔn))×V樣總÷W=2×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W
C標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,0.4mg/mL;V樣總:加入試劑四體積,5mL;W:樣本質(zhì)量,g。
注意事項:

  1. 反應(yīng)后建議在20min內(nèi)檢測完成防止褪色。

  2. 若A測定大于1,建議樣本上清用試劑四稀釋后再進(jìn)行測定;若A測定低于0.03時,可以提取時減少試劑四體積進(jìn)行測定。注意同步修改計算公式。

實驗實例:

  1. 取0.01g烘干玉米于研缽中研碎,加入 1mL試劑一,充分勻漿后轉(zhuǎn)移到 EP 管中,80℃水浴提取30min3000g,25℃離心 5min,棄上清,留沉淀,加入1mL試劑二(乙*)振蕩5min,3000g25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入5mL試劑四充分溶解,90℃水浴10min,冷卻后3000g,25℃離心5min,取上清,之后按照測定步驟操作,測得計算ΔA測定=A測定-A空白)-A’測定-A’空白)=0.664-0.003-0.474-0.034=0.221ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)-A’標(biāo)準(zhǔn)-A’空白)=0.723-0.003-0.447-0.034=0.307,按樣本質(zhì)量計算含量得:直鏈淀粉含量(mg/g 質(zhì)量)=2×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=143.97 mg/g質(zhì)量。

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